Wirkung und qPCR-basierte Quantifizierung von miRNAs in Tumorzellen

📘 RNA Interferenz ist ein naturlicher biologischer Prozess, der besonders in den letzten beiden Dekaden in das Zentrum der Forschung geruckt ist. MIRNAs und siRNAs, kurze RNA Sequenzen, interferieren mit komplementarer mRNA und schalten so bestimmte Gene ab. Diese Methode gilt als zukunftsversprechend im Bezug auf Krebstherapie, Autoimmunerkrankungen, und dergleichen mehr. In der vorliegenden Arbeit wurde der Blick auf das Ausma? der miRNA Wirkung in Tumorzellen gelegt. Je nach Tumorart werden miRNAs in Tumorzellen hinauf- oder hinunterreguliert. Eine komplementare Bindung einer anti-Tumor miRNA an die gewunschte mRNA kann Apoptose oder ein Anhalten des Zellzyklus bewirken. Fur eine aussagekraftige Bestimmung des miRNA Potentials, ist es notwendig Referenzgene zu finden, welche durch miRNA und siRNA Transfektionen nicht bzw. nur sehr wenig beeinflusst werden und eine moglichst geringe Schwankungsbreite aufweisen. Aus diesem Grund wurde eine Analyse mittels RT-qPCR mit unterschiedlichen Referenzgenen in drei verschiedenen Zelllinien durchgefuhrt.